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深圳科软KR仿手工甩干式全自动酶标洗板机在无偿献血抗-HIV初筛与确认实验分析中的应用

2014年01月13日 00:03:22 发布

试剂与仪器抗-HIV检测试验来源于北京万泰(以下简称A)和华大吉比爱(以下简称B )两个厂家。两种试剂均通过中国药品生物鉴定所批批检合格,并在有效期内使用。所用仪器主要有STAR全自动加样系统、HT3型、340RT型酶标仪,深圳科软洗板机等。

       科软仿手工甩干式全自动洗板机是传统洗板机和传统甩干机的有机组合的一体机。相对传统洗板机而言,其最大特点是:1、不用人工拍板;2、不会堵针;3、故障低;4速度快。

       不吸液:删除吸液针等吸液系统,利用旋转和重力去液。

       无污染:水平放板,旋转向下甩液,保证最大程度去液。独特锅底状接液设计,极难反溅。独有的防污染预处理洗板程序。

       免拍板:微孔内无残留,洗好后不用人工拍板。免除拍板给环境和使用者造成的不利影响。

       不堵孔:无吸液针,极大地降低堵孔风险。注液针防堵孔处理,实现注液针不堵孔。闲时管路自动清洗,避免结晶堵塞。开关机自动维护,保证管路内畅通无阻。

       不撞针:注液针不移动,与微孔板保持足够距离,有效保护酶标板和孔内包被。

       可条洗:每块板可以任选条数进行清洗,节省洗液,保护环境。

       速度快:一次可洗16块板,KR306洗好6块板约4分钟。


      试剂的灵敏度和特异性直接影响着检测结果。尽管血液中心每年都要用血清盘和质控血清来选择试剂厂家,而试剂厂家对HIV酶联免疫检测试剂也不断的改进和完善,但抗-HIV ELISA检测的假阳性问题仍然比较凸显,现将本中心2010年抗-HIV初筛有阳性反应的标本和内蒙古CDC确证实验室反馈的结果分析报告如下:

1 材料与方法

         1. 1 标本来源 2010年1月至12月,呼和浩特地区各企事业、大专院校、部队、街头等自愿无偿献血标本29719份。献血前均根据《献血者健康检查标准》进行体检和血液初筛,符合献血标准者方可献血。

        1 . 2 试剂与仪器抗-HIV检测试验来源于北京万泰(以下简称A)和华大吉比爱(以下简称B )两个厂家。两种试剂均通过中国药品生物鉴定所批批检合格,并在有效期内使用。所用仪器主要有STAR全自动加样系统、HT3型、340RT型酶标仪,深圳科软洗板机等。

        1 . 3 方法按照《全国艾滋病检测技术规范》要求和厂家试剂说明书要求进行操作和结果判定。初筛呈阳性反应性的标本送至内蒙古CDC确证实验室进行确证试验。
2 结果
       用A、B两种试剂对29719份献血者标本进行初检和复检,对呈阳性反应的标本用同种试剂进行双孔复检。其中两种试剂检出-HIV呈阳性反应的有12份,占标本总数0. 040%,A试剂检出-HIV有阳性反应的标本39份,占标本总数0 .1 3 % J试剂检出-HIV有阳性反应的标本30份,占标本总数0.10% 。按照艾滋病检测规范要求,对两种或一种试剂检出的共81份呈阳性反应的标本送至内蒙古CDC确认实验室进行确认。反馈结果为54份呈阴性反应(A试剂30份,B试剂19份,AB两种试剂5份),不确定标本23份,(A试剂9份,B试剂11份,AB两种试剂3 份),确证HIV - 1抗体阳性标本4 份。见下表。

3 讨论
       从上表可以看出抗-HIV检测试验中存在着无法避免的假阳性问题。两个厂家的试剂检测结果也存在着一定的差异。这与下列因素有直接关系。(1)酶联免疫法本身的局限性,它是一个定性分析试验,试验结果并不能准确反映HIV(1 +2)抗体的滴度。而厂家使用的抗原原料也不同,所以反应性存在着一定的差异,使其在试剂的灵敏度、特异性也存在着一定的差异,从而造成检测结果的不同。另外,献血员初筛所用的检测试剂和内蒙古CDC确证实验室所采用的试剂是两种完全不同的检测试剂。其检测原理和判定方法也不同,因此抗- HIV初筛和确证结果存在差异。(2)由于检验科所使用的是全自动加样器,加样器多采用金属针连续加样,当遇到高滴度阳性标本时,可引起托带现象,使标本污染,,造成假阳性。(3)留取标本过快或保存标本运输过程中使样本溶血,红细胞内酶类物质的非特异性反应等原因也可以导致假阳性反应。另外用ELISA法检测抗体的过程中有些疾病(自身免疫性疾病如类风湿)也可导致抗-HIV假阳性。
       当今在血液资源这么紧张的情况下,检验结果的假阳性,不但造成了血液的浪费,也淘汰了宝贵的献血者,同时对献血者反馈化验结果的解释工作也带来了很大的困难。因此,为了避免漏检和取得较低的假阳性率。在选择厂家试剂时,试剂的灵敏度和特异性是非常重要的。还要结合当地气候的特点,对试剂的选购、运输、储存应严格把关。加强新购试剂质量检测和使用前的确认。加强实验室科学管理,强化标准化流程操作,在检测样本时,严格按照检测技术规范和试剂说明书要求进行操作,提高操作人员的技术水平和素质,充分掌握ELISA检测抗-HIV诸多影响因素和环节,减少假阳性的出现,避免抗-HIV阳性漏检,确保检验结果的准确有效,保障血液安全。

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